È un registro contabile in cui vengono raccolti tutti i conti (mastrini) interessati dalla gestione dell'attività, cioè le entrate e le uscite delle merci. Il libro è formato da due colonne "Dare ed Avere". In esse vengono riportate sistematicamente tutte le operazioni di gestione dell'attività. A differenza del libro giornale dove le operazioni imprenditoriali devono essere compilate in modo cronologico, II libro mastro riassume la situazione di ogni conto. Questo registro deve essere conservato per 10 anni, a partire dall'ultima rilevazione. Ciò va fatto anche se l'azienda ha cessato l'attività, ai fini di eventuali accertamenti fiscali.